梨树苗疱症溃疡病的主要防治措施

1.梨疱症溃疡病的分布及危害如何?

梨疱症溃疡病是危害梨苗树皮的主要病症，也称梨抱斑病(Pear blister canker disease) (Cropley，1960)、梨粗皮病(Pear rough bark disease) (Kristensen等，1957)、梨裂皮病(Pear bark split disease)(Kegler, 1965)、梨树皮坏死病(Pear bark necrosis disease) (Kegler，1967)、梨斑疹病 (Pear bark measles disease) (Cordy 1961)。

目前欧洲的法国、西班牙、意大利有梨疱症溃疡病的发生报道。

2.如何识别梨疱症溃疡病?

梨疱症溃疡病能潜伏侵染很多梨栽培品种，如Williams、Comice^Berre Hardy等。在法国，大约10%的梨树栽培品种被无 症侵染。在所有的品种中，仅A2。能作为指示植物。A2。被侵染后 能形成典型的疱斑症状，通常在被侵染的翌年，树皮上出现脓疱或 表皮裂纹，进而形成零散的溃疡、鳞状树皮或是深的树皮裂缝，叶 片和果实不表现病理症状，梨树得病后5〜8年死亡。

3.怎样鉴定梨疱症溃疡病类病毒?

Flores等(1991)证实梨疱症溃疡病是由梨疱症溃疡类病毒 (Pear blister canker viroid ,PBCVd)引起的，属于马铃暮纺键块 莲类病毒科，苹果诱皮类病毒属(Apscaviroid)。

(1)寄主植物梨(P. communis)和棍梓(Cydonia oblonga )是仅知的PBCVd的自然寄主。在欧洲，榲桴的压条经常作为梨 树的砧木，这可能是该病害的侵染源。PBCVd能通过机械传播到 黄瓜(CwcTMmis 植株上，并引起温和的皱缩、卷叶症状，或没有症状(Flores等，1991)。另外，PBCVd还可潜伏侵染梨属 CPyrus)、木瓜属(C/iaewomeZes)、榲桴属(Cydonia)、花楸属(Sor~bus)植物，似不能侵染苹果觸(Malus)、唐禄属(Ameianchier)、腺肋花楸M(Aronia)、枸子M (Cotoneaster)植物。梨树是唯一提纯 到该类病的寄主(Fores等，19 91)。

(2)形态特征病原为一共价闭合的单链RNA分子，分离物 P2098T长315个核苷酸残基，能形成半杆状的二级结构，碱基组 成为 G : C: A : U = 31：4 : 29. 2 1 17. 1 : 22. 2 (Hernandez 等， 1992a)。分离P1914T、P47A和一意大利分离物有315〜316 个核苷酸，与P2098T分离物的序列有微小的差异(Loreti等， 1997)。PBCVd含有苹果锈皮类病毒属成员均保 守的中央保守区和左端保守区(Flores等，1997)。

(3)鉴别寄主反应梨八2。可作为鉴别寄主。梨树苗或榲桴 的压条用梨A2。及待测材料双重嫁接，若该材料带毒，在田间2年 后，A2。树皮上出现该病害典型症状。近来发现的另外两个指示植 物品种Fieud 37和Fieud 110,在温室条件下接种后3〜4个月能 在叶片和幼茎上形成溃疡，并很快死去。PBCVd在指示植物A2。 和Fieud 37上引起的症状相似，其严重程度取决于侵染的分离 物。在已被克隆的3个分离物中，P47T引起的症状为严重，其 次为P2098T，P1914T弱。症状的差异可能是由于3个分离物 微小的核苷酸差异引起的(Ambr6s等，1995)。

(4)聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) PBCVd能通过聚丙烯酰 胺电泳，其方法与其他类病毒相似(Flores等，1991)。先用提取缓 冲液(2 倍体积 0. 1M pH 8. 5 的 Tris-HCUIM NaCl,l%的 SDS, 0. 5%的DIECA，lg/10g组织的PVP)磨粹的植物组织，酚氣仿抽 提释放核酸，后用methoxyethanol抽取以除去植物组织中的多 糖，核酸用CTAB沉淀，经CF-11纤维素柱纯化即得到类病毒核 酸粗提液。100克得病的梨树叶活树皮鲜组织能提纯到0. 5〜1 微克PBCVd(Flores 等，1991)。 .

粗提液经聚丙烯酰胺凝胶双向电泳后，环状的类病毒RNA条带与植物组织的RNA分开，环状的RNA具有侵染性，切特 异的类病毒条带，洗脱凝胶，得到髙度纯化的类病海核酸，纯化的核酸通过机械接种至梨无性系八2。幼苗上，观察其出现的症状，以进一步确认类病毒的存在。

(5)核酸杂交和RT-PCR由于鉴别寄主症状形成较慢，用放射性或非放射性探针标记的互补DNA作探针进行核酸杂交能较 容易地鉴定PBCVd,其灵敏度较PAGE法高得多(Ambr6s等， 1995)。根据报道的序列合成专化性的PCR引物进行反转录 PCR检测，其灵敏度髙，快速简易，能同时处理多个样品，但易产生細性。

4.梨疱症溃疡病的发病有何规律?

梨疱症溃疡病毒能通过嫁接、芽接传播，在实验条件下也能通 过刀具传播，但没有介体及种子传毒报道。

5.怎样防治梨疱症溃疡病?

(1)禁止从疫区进口鳄梨及其相关的繁殖材料，如有特殊需要 进口时应限制进口数量，并有出口国的检疫证书。

(2)热处理不能灭活带毒材料中的PBCVd，可通过使用无毒 繁殖材料来控制该病害。

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