梨树苗腐烂病致病的室内快速测定方法

一、针对的产业问题

梨树腐烂病在中国各梨产区均有分布，尤以东北、华北和西 北梨区为害较重，常造成大量死树，甚至毁园。梨树腐烂病菌致病室内测定方法的建立，可为进一步深入研究我国不同梨产区 和不同梨苗品种上腐烂病菌致病力的分化状况和梨对腐烂病的抗性资源及防治药剂的筛选奠定技术基础。

二、技术要点

枝条用无菌水洗净晾干，经75%酒精消毒后将其剪成15厘 米小段，两端用石蜡封口。伤口处理用灭菌的直径5毫米打孔器 取下树皮韧皮部。梨腐烂病菌株在PDA培养基上培养2天后，用 5毫米打孔器从最外缘打取菌丝块，接种于伤口处，并在菌丝块 上面覆盖滴有无菌水的脱脂棉保湿，以空白PDA培养基接种作为 对照。接种后的枝条置于白盘中(盘底铺滴有无菌水的灭菌纱布， 盘口覆保鲜膜)，在25°C条件下培养4天后测定其病斑的长度。

三、适宜区域

全国各梨产区。

四、注意事项

当采用枝条打孔接种法测定梨树腐烂病菌致病力的强弱时，为保证其测定结果的准确性，根据本试验的研究，需对接种体、 接种枝条和培养条件进行选择和控制。前期预备试验中，在梨枝 条上多次采用梨树腐烂病菌的分生孢子悬浮液进行活体和离体接 种，结果显示发病率均很低，因此接种体以选取PDA培养基最 外缘病菌生长最旺盛的菌丝块为宜。接种枝条则需选取梨同一品 种同株树上长势相同的1年生健康枝条，剪成长短均匀的小段, 两端用石蜡封口，使其含水量保持一致。此外，伤口接种后的 培养需在保湿控温条件下进行。在接种的菌丝块上面權盖滴有 灭菌水的脱脂棉保湿，将巳接种的枝段置于塑料盘中培养， 盘底铺上滴有无菌水的灭菌纱布，盘用保鲜膜封闭。培养温度控制在25摄氏度。

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